PRÁCTICA 22. ESTUDIO DE HECES.

PRÁCTICA 1.CONSTRUCCIÓN DE UNA CURVA  DE CALIBRACIÓN Y MANEJO DEL ESPECTROFOTÓMETRO.
       
                            FECHA: 20/09/2017


OBJETIVO
Utilizar dos colorantes como analitos con capacidad cromógena para elaborar sendas baterías de dilución seriadas.

FUNDAMENTO
Realizar medidas espectrofotométricas, elaboraremos las correspondientes curvas de calibración y calcular la concentración de diversas disoluciones problemas.

APARATOS
-Espectrofotómetro de absorción

MATERIAL
-Agua destilada   -Cubetas de espectrofotometría     -2 Erlenmeyer
-Pipetas manuales y automáticas     -Tubos de ensayo 10ml  -Gradillas  -Auxiliar de pipeteo -Cubo de sucio

REACTIVOS
-Cromógeno1, de concentración 800mg/dl (Azul)
-Cromógeno2, de concentración 600mg/dl ( Rojo)

PROCEDIMIENTO

BATERÍA DE DILUCIÓN AZUL

1.Realizamos las operaciones para obtener el volumen de paso.
    Factor de dilución ½. Cada tubo tendrá 4ml.

       4ML de volumen de paso.

2.En una gradilla colocamos 5 tubos de ensayo , rotulamos con números del “1 al 5” , añadimos a cada tubo 4ml de agua destilada  con una pipeta de 5ml.

3.Al primer tubo de la batería de dilución añadimos 4ml de la disolución de color azul, homogeneizamos y cogemos 4ml, lo añadimos al tubo Nº2,homogeneizamos, volvemos a coger 4ml, pasamos al tubo Nª3,homogeneizamos, cogemos 4ml, pasamos al tubo Nº4, homogeneizamos , pasamos al tubo Nº5, homogeneizamos y finalmente cogemos 4ml y lo tiramos a un cubo de sucio.

4.Colocamos a cada tubo un tapón
5.Mediremos la absorbancia de cada uno de los tubos, en el espectrofotómetro de absorción que previamente de encendido.

Pondremos el programa adecuado, junto con los parámetros adecuados.
6. Numeramos las cubetas de espectrofotometría.
7.La primera cubeta que introduciremos en el espectrofotómetro será la de Blanco ( Agua destilada ), se deberá poner a 0.00.
Mediremos todos los demás tubos echando su contenido en su cubeta correspondiente, evitaremos tocar la parte lisa, si cayera liquido o si se ensucia por esta parte se deberá limpiar.

RESULTADOS
1.0,334
2.0,180
3.0,086
4.0,044
5.0,024

TUBO PROBLEMA. 0,150

BATERÍA DE DILUCIÓN ROJA

1.Realizamos las operaciones para obtener el volumen de paso.
Factor de dilución ⅓ . Cada tubo tendrá 3ml.

  1,5ML de volumen de paso

2.En una gradilla colocamos 4 tubos de ensayo , rotulamos con números del “1 al 4” , añadimos a cada tubo 3 ml de agua destilada  con una pipeta de 5ml.

3.Al primer tubo de la batería de dilución añadimos 1,5ml de la disolución de color azul, homogeneizamos y cogemos 1,5ml, lo añadimos al tubo Nº2,homogeneizamos, volvemos a coger 1,5ml, pasamos al tubo Nª3,homogeneizamos, cogemos 1,5ml, pasamos al tubo Nº4, homogeneizamos ,  y finalmente cogemos 1,5ml y lo tiramos a un cubo de sucio.

   

4.Colocamos a cada tubo un tapón.
5.Mediremos la absorbancia de cada uno de los tubos, en el espectrofotómetro de absorción que previamente de encendido.
Pondremos el programa adecuado, junto con los parámetros adecuados.
6. Numeramos las cubetas de espectrofotometría.

7.La primera cubeta que introduciremos en el espectrofotómetro será la de Blanco ( Agua destilada ), se deberá poner a 0.00.
Mediremos todos los demás tubos echando su contenido en su cubeta correspondiente, evitaremos tocar la parte lisa, si cayera liquido o si se ensuciara por esta parte se deberá limpiar.

RESULTADOS
1.0,673
2.0,252
3.0,102
4.0,045