PRÁCTICA 2.CUANTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS EN ORINA CON ÁCIDO SULFOSALICÍLICO POR TURBIDIMETRÍA.

                                    FECHA: 28/09/2017
OBJETIVO
Cuantificar la concentración de proteínas presentes en una muestra de orina con ácido sulfosalicílico por métodos turbidimétricos.

UTILIDAD CLÍNICA
Cuantificar las proteínas en una orina

FUNDAMENTO
La adición de ácido sulfosalicílico a una solución de proteínas actúa sobre estas, dando lugar a la aparición de un fino precipitado en suspensión. Este precipitado se observa como una turbidez blanquecina
cuya intensidad puede ser cuantificada por turbidimetría.

APARATOS
-Fotómetro

MATERIAL
 -Cubetas de fotometría   -Cubo de sucio  -Gradillas  -Tubos de ensayo 10ml
-Pipetas manuales y automáticas        -Auxiliar de pipeteo -Muestra de orina

REACTIVOS
Suero salino fisiológico ( 0,9 g/dl)
Ácido sulfosalicílico al 3% (p/v) en agua destilada
Patrón de proteínas 7g/dl
Albumina bovina

PROCEDIMIENTO
1.Añadimos a la orina Albúmina

BR
P1
P2
P3
P4
BM
PB
SSF
0,5






D1

0,5





D2


0,5




D3



0,5



D4




0,5


ORINA





0,5
0,5
A.SULFOSALICÍLICO
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0
2,0
y rotulamos los tubos.
P1,P2,P3,P4,BR,BM,PB,PB2

2.Preparamos 200ml al 3% en agua destilada.
3.Añadimos a cada tubo 10ml de suero fisiológico y quitamos con una pipeta automática.
P1: 0,2ml    P2: O,1ML     P3:0,05ml    P4:0,025ml


4.añadimos a cada tubo:
*Añadimos a todos los tubos 2ml de A.Sulfosalicilico menos al “BM”.


*Añadimos a los tubos “BM y PB” 0,5ml de orina.
*Añadimos suero salino a los tubos “BR ( 0,5ml) y BM (2ml)”
*Añadimos a los tubos 0,5ml de      
                 D1        P1
                                D2        P2
                                D3        P3
                                D4        P4

   

5Medir las absorbancias de los tubos, previamente se ha encendido el fotómetro:
    -Seleccionar la longitud de onda a 660nm
    -Poner a 0 el fotómetro con el BR
    -Medir la absorbancia de p1,p2,p3 y p4
    -Medir BM hasta que se ponga 0
    -Medir la absorbancia de PB1 y PB2

RESULTADOS
BR:0
P1:0,482
P2:0,298
P3:0,240
P4:0,185
BM:0
PB:0,983
PB2:0,165

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