PRÁCTICA 16. CREATININA.
CREATININA
FECHA:11/01/2018
OBJETIVO:
Determinar la cantidad de creatinina cuantitativamente por métodos colorimétricos.
UTILIDAD CLÍNICA:
El ensayo de la creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé.
La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo utilizado para la lectura elimina las interferencias del método.
La intensidad del color formado es proporcionar a la concentración de creatinina en la muestra ensayada.
FUNDAMENTO:
La creatinina es el resultado de la desgradación de la creatina, componente de los musculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía de las células.
La producción de creatinina depende de la masa muscular .Los niveles suelen ser muy estables.
Se elimina a través del riñón.
Niveles altos de creatinina son indicativos de patologías renales.
APARATAJE:
Espectrofotómetro
MATERIALES:
Suero o plasma
Cubetas
Gradillas
Pipetas automáticas
Puntas de pipetas
Tubos de ensayo
REACTIVOS:
R1
R2
Creatinina cal
PROCEDIMIENTO:
1.Encender el espectrofotómetro y ajustar.
2.Prepara los reactivos, mezclar volúmenes iguales de R1 Y R2. Anteriormente se han atemperado. Repartir para cada de trabajo unos 5ml en un tubo. Añadimos 20ml de cada reactivo en total obtenemos 40ml.
3.Rotulamos 3 tubos con muestra, patrón y blanco. Añadimos a cada tubo:
OBJETIVO:
Determinar la cantidad de creatinina cuantitativamente por métodos colorimétricos.
UTILIDAD CLÍNICA:
El ensayo de la creatinina esta basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffé.
La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo utilizado para la lectura elimina las interferencias del método.
La intensidad del color formado es proporcionar a la concentración de creatinina en la muestra ensayada.
FUNDAMENTO:
La creatinina es el resultado de la desgradación de la creatina, componente de los musculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía de las células.
La producción de creatinina depende de la masa muscular .Los niveles suelen ser muy estables.
Se elimina a través del riñón.
Niveles altos de creatinina son indicativos de patologías renales.
APARATAJE:
Espectrofotómetro
MATERIALES:
Suero o plasma
Cubetas
Gradillas
Pipetas automáticas
Puntas de pipetas
Tubos de ensayo
REACTIVOS:
R1
R2
Creatinina cal
PROCEDIMIENTO:
1.Encender el espectrofotómetro y ajustar.
2.Prepara los reactivos, mezclar volúmenes iguales de R1 Y R2. Anteriormente se han atemperado. Repartir para cada de trabajo unos 5ml en un tubo. Añadimos 20ml de cada reactivo en total obtenemos 40ml.
3.Rotulamos 3 tubos con muestra, patrón y blanco. Añadimos a cada tubo:
Blanco
|
Patrón
|
Muestra
|
|
RT (mL)
|
1.0
|
1.0
|
1.0
|
Patrón (micro-L)
|
--
|
100
|
--
|
Muestra (micro-L)
|
--
|
--
|
10
|
4. Homogeneizar y poner en marcha el cronometro.
RESULTADOS:
5. Leer la absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos y al cabo
de 90 segundos (A2).
-PATRÓN: 30s 0,011 A1 / 90s 0,026 A2
-BLANCO: 0,000
M A= 0,382-0,336= 0,046
P A= 0,026-(-0,011)= 0,037
0,046/0,037x2= 2,48 mg/dl de creatinina en la muestra
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